Die Fluoreszenz- in-situ -Hybridisierung (FISH) ist eine von mehreren Techniken, mit denen Sie die DNA Ihrer Zellen durchsuchen und nach dem Vorhandensein oder Fehlen bestimmter Gene oder Genteile suchen.1
Viele verschiedene Krebsarten gehen mit bekannten genetischen Anomalien einher. Und mit genetischer Veranlagung meinen wir nicht nur Vererbung. Im Laufe eines Lebens können Zellen bei der Teilung und beim Wachstum Fehler machen. In diesen Zellen können sich Mutationen in der DNA ansammeln, die mit Krebs in Zusammenhang stehen.
Inhaltsverzeichnis
Wie es funktioniert
FISH ist eine Technik, die fluoreszierende Sonden verwendet, um bestimmte Gene oder Teile von Genen (DNA-Sequenzen) zu erkennen. Das Laborpersonal medizinischer Zentren und Onkologen nutzen FISH, um Patienten zu beurteilen, die möglicherweise an Krebs erkrankt sind, und manchmal auch, um einen Patienten zu überwachen, bei dem bereits Krebs diagnostiziert und behandelt wurde.2
Für die FISH können je nach Ort und Art des vermuteten Krebses verschiedene Arten von Proben verwendet werden: Tumorzellen , die aus peripherem Blut, aus einer Knochenmarksbiopsie oder aus einer Lymphknotenbiopsie gewonnen wurden, und formalinfixiertes, in Paraffin eingebettetes Gewebe (dies bezieht sich auf eine Gewebeprobe, die im Labor verarbeitet und in eine Art Wachs eingebettet wird, wodurch sie steifer wird, sodass sie in dünne Scheiben geschnitten und zur Betrachtung unter dem Mikroskop montiert werden kann.
Was die Buchstaben bedeuten
Das „H“ in FISH bezieht sich auf Hybridisierung. Bei der molekularen Hybridisierung wird eine markierte DNA- oder RNA-Sequenz als Sonde verwendet – stellen Sie sich sozusagen einen roten Legostein vor. Die Sonde wird verwendet, um einen entsprechenden Legostein oder eine DNA-Sequenz in einer biologischen Probe zu finden.
Die DNA in Ihrer Probe ähnelt Stapeln von Legosteinen, und die meisten Steine in diesen Stapeln passen nicht zu unserer roten Sonde. Und alle Ihre Bausteine sind ordentlich in 23 Ziegelstapelpaaren organisiert – jeder Stapel ist mehr oder weniger eines Ihrer gepaarten homologen Chromosomen. Im Gegensatz zu Legosteinen ist unsere rote Lego-Sonde wie ein starker Magnet und findet ihr Gegenstück, ohne die Stapel sortieren zu müssen.
Das „F“ bezieht sich auf Fluoreszenz. Unsere rote Sonde könnte in den Ziegelhaufen verloren gehen, daher ist sie mit farbigem Fluoreszenzfarbstoff markiert, damit sie leuchtet. Wenn es seine Übereinstimmung unter den 23 gepaarten Stapeln findet, verrät eine fluoreszierende Markierung seinen Standort. Jetzt können Sie sehen, wie Forscher und Kliniker FISH verwenden könnten, um herauszufinden, wo (welcher Stapel oder welches Chromosom) sich ein bestimmtes Gen für eine bestimmte Person befindet.
Das „I“ und das „S“ stehen für in situ . Gemeint ist damit, dass unser roter Legostein in der von Ihnen gegebenen Probe nach seinem Gegenstück sucht .
FISH und spezifische Blutkrebsarten
FISH und andere In-situ- Hybridisierungsverfahren werden zur Diagnose einer Vielzahl von Chromosomenanomalien eingesetzt – Veränderungen im genetischen Material, Veränderungen in den Chromosomen, einschließlich der folgenden:3
- Deletion: Ein Teil eines Chromosoms ist verschwunden
- Translokation: Ein Teil eines Chromosoms bricht ab und bleibt an einem anderen Chromosom hängen
- Inversion: Ein Teil eines Chromosoms bricht ab und wird wieder eingesetzt, jedoch in umgekehrter Reihenfolge
- Duplikation: Ein Teil eines Chromosoms ist in der Zelle in zu vielen Kopien vorhanden
Jede Krebsart kann ihre eigenen chromosomalen Veränderungen und relevanten Sonden aufweisen. FISH hilft nicht nur dabei, die anfänglichen genetischen Veränderungen bei einem Krankheitsprozess wie Krebs zu identifizieren, sondern kann auch zur Überwachung des Ansprechens auf eine Therapie und der Remission der Krankheit eingesetzt werden.4
Die durch FISH erkannten genetischen Veränderungen liefern manchmal zusätzliche Informationen darüber, wie sich der Krebs einer Person wahrscheinlich verhält, basierend auf früheren Beobachtungen bei Menschen mit derselben Krebsart und ähnlichen genetischen Veränderungen. Manchmal wird FISH verwendet, nachdem die Diagnose bereits gestellt wurde, um zusätzliche Informationen zu sammeln, die helfen könnten, das Ergebnis eines Patienten oder die beste Behandlung vorherzusagen.
FISH kann Chromosomenanomalien bei Leukämien , einschließlich chronischer lymphatischer Leukämie (CLL), identifizieren .5Bei chronischer lymphatischer Leukämie/kleinem lymphatischen Lymphom ermöglicht FISH den Patienten, ihre Prognosekategorie herauszufinden: gut, mittel oder schlecht. Bei akuter lymphoblastischer Leukämie (ALL) kann die Genetik der Leukämiezellen Aufschluss über das Krebsrisiko geben und bei therapeutischen Entscheidungen helfen.
FISH-Panels sind auch für Lymphome, multiple Myelome, Störungen der Plasmazellproliferation und das myelodysplastische Syndrom verfügbar.6Im Fall des Mantelzelllymphoms gibt es beispielsweise eine Translokation namens GH/CCND1 t (11;14), die FISH erkennen kann und die häufig mit diesem Lymphom assoziiert ist.
Warum FISCHEN?
Ein Vorteil von FISH besteht darin, dass es nicht an Zellen durchgeführt werden muss, die sich aktiv teilen. Zytogenetische Tests dauern in der Regel etwa drei Wochen, da die Krebszellen etwa zwei Wochen lang in Laborschalen wachsen müssen, bevor sie getestet werden können. Im Gegensatz dazu liegen FISH-Ergebnisse in der Regel innerhalb weniger Tage im Labor vor.7
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