Elektrophorese: Was es ist, wozu es dient und wie es durchgeführt wird

Was ist das:

Elektrophorese ist eine Labortechnik mit dem Ziel, DNA-, RNA- oder Proteinmoleküle nach ihrer Größe und elektrischen Ladung zu trennen.

Diese Technik ist einfach und kostengünstig und ermöglicht die Diagnose von Krankheiten wie Sichelzellenanämie, die Überprüfung der Expression von Proteinen oder die Identifizierung von Mikroorganismen.

Elektrophorese wird als Routinetechnik in Labors und Forschungsprojekten eingesetzt. Abhängig vom Zweck dieser Untersuchung können weitere Tests erforderlich sein, um bestimmte Diagnosen zu stellen.

Wozu dient es?

Elektrophorese dient dazu:

• Identifizieren Sie Viren, Pilze, Bakterien und Parasiten, wobei diese Anwendung häufiger in Forschungsprojekten vorkommt.
• Vaterschaftstest;
• Überprüfen Sie die Proteinexpression;
• Identifizieren Sie Mutationen, was beispielsweise bei der Diagnose von Leukämien nützlich sein kann;
• Analysieren Sie die Arten des zirkulierenden Hämoglobins, was bei der Diagnose von Sichelzellenanämie hilfreich ist.
• Beurteilen Sie die Menge der im Blut vorhandenen Proteine;
• Diagnostizieren Sie Erkrankungen, die Plasmazellen betreffen, wie Waldenström-Makroglobulinämie, monoklonale Gammopathie unbestimmter Bedeutung (MGUS) oder primäre Amyloidose.

Die Proteinelektrophorese kann auch zur Diagnose von Schilddrüsenproblemen, Diabetes, Lebererkrankungen und einigen Autoimmunerkrankungen eingesetzt werden.

Je nach Zweck der Elektrophorese können für die Diagnosestellung durch den Arzt weitere ergänzende Untersuchungen wie beispielsweise ein Blutbild, Nieren- und Leberfunktionstests oder Röntgenaufnahmen erforderlich sein.

Arten der Elektrophorese

Die Elektrophorese zur Identifizierung von Mikroorganismen wird am häufigsten in Forschungslabors durchgeführt. Zu diagnostischen Zwecken kann die Elektrophorese jedoch zur Identifizierung hämatologischer Erkrankungen und Krankheiten eingesetzt werden, die sich mit zunehmender Proteinmenge entwickeln. Die wichtigsten Arten der Elektrophorese sind:

1. Hämoglobin-Elektrophorese

Die Hämoglobin-Elektrophorese ist eine Labortechnik zur Identifizierung der verschiedenen im Blut zirkulierenden Hämoglobintypen, die es ermöglicht, das Vorhandensein von Krankheiten im Zusammenhang mit der Hämoglobinsynthese festzustellen.

Die Art des Hämoglobins wird durch Elektrophorese bei einem bestimmten pH-Wert, idealerweise zwischen 8,0 und 9,0, anhand eines Bandenmusters identifiziert, das mit dem normalen Muster verglichen werden kann, sodass das Vorhandensein von abnormalem Hämoglobin identifiziert werden kann.

Wofür es gemacht ist:Die Hämoglobin-Elektrophorese wird zur Untersuchung und Diagnose von Krankheiten durchgeführt, die mit der Hämoglobin-Synthese zusammenhängen, wie z. B. Sichelzellenanämie und Hämoglobin-C-Krankheit, und ist außerdem nützlich bei der Differenzierung von Thalassämien. Erfahren Sie, wie Sie die Hämoglobin-Elektrophorese interpretieren.

2. Proteinelektrophorese

Die Proteinelektrophorese ist ein von einem Arzt angeordneter Test, um die Menge der im Blut zirkulierenden Proteine ​​zu bestimmen und so Krankheiten zu erkennen.

Dieser Test wird anhand einer Blutprobe durchgeführt, die zentrifugiert wird, um Plasma zu gewinnen, das den Teil des Blutes darstellt, der unter anderem aus Proteinen besteht.

Nach der Elektrophorese kann ein Bandenmuster visualisiert werden und anschließend ein Diagramm, das die Menge jeder Proteinfraktion anzeigt, was für die Diagnose unerlässlich ist.

Wofür es gemacht ist:Mithilfe der Proteinelektrophorese kann der Arzt das Auftreten von multiplem Myelom, Dehydration, Zirrhose, Entzündung, Lebererkrankung, Pankreatitis, Lupus und Bluthochdruck anhand des Bandenmusters und der im Untersuchungsbericht dargestellten Grafik untersuchen. Verstehen Sie, wie es durchgeführt wird und wie Sie die Ergebnisse der Proteinelektrophorese verstehen.

Wie es hergestellt wird

Um eine Elektrophorese durchzuführen, müssen Sie:

1. Bereiten Sie ein Agarose- oder Polyacrylamidgel vor, abhängig vom Ziel der Durchführung der Technik. Darüber hinaus müssen Sie über eine Pufferlösung, einen Elektrophoresetank, einen Molekulargewichtsmarker und eine Substanz verfügen, die es ermöglicht, Proben zu betrachten, wenn sie UV- oder LED-Licht ausgesetzt werden.
2. Geben Sie jede Probe in eine Vertiefung des Gels, Mischen einer kleinen Menge Molekulargewichtsmarker;
3. Geben Sie eine Positivkontrolle in eine der Vertiefungen., das ist die Substanz, von der wir wissen, was sie ist, und in einer anderen Quelle die Negativkontrolle, um die Gültigkeit der Reaktion zu garantieren. In beiden Vertiefungen muss außerdem ein Molekulargewichtsmarker vorhanden sein;
4. Geben Sie das Gel in den ElektrophoresebehälterWenn nicht, mit der spezifischen Pufferlösung und schalten Sie das Gerät ein, so dass ein elektrischer Strom erzeugt wird, der eine Potentialdifferenz erzeugen und Partikel entsprechend ihrer Ladung und Größe trennen kann. Die elektrophoretische Laufzeit variiert je nach Ziel des Eingriffs und kann bis zu 1 Stunde dauern;
5. Visualisieren Sie das Elektrophoreseergebnis mit dem Transilluminator. Wenn das Gel UV- oder LED-Licht ausgesetzt wird, ist es möglich, das Bandenmuster sichtbar zu machen: Je größer das Molekül, desto geringer ist seine Wanderung und es kommt näher an die Vertiefung heran, während je heller das Molekül ist, desto größer ist das Migrationspotential.

Damit die Reaktion validiert werden kann, müssen die Banden der Positivkontrolle sichtbar sein und in der Negativkontrolle darf nichts zu sehen sein, andernfalls deutet dies auf eine Kontamination hin und der gesamte Vorgang muss wiederholt werden.