Procedura barwienia metodą Grama w badaniach i laboratoriach

Barwienie metodą Grama to procedura mikrobiologiczna , która kategoryzuje bakterie na podstawie struktury fizycznej i chemicznej ich zewnętrznej powierzchni. Odbywa się to za pomocą szkiełka, mikroskopu i plam. Procedura ta jest powszechnie stosowana do wykrywania i identyfikacji bakterii zarówno w laboratoriach badawczych, jak i klinicznych.1

 

Gram-dodatnie i Gram-ujemne

Bakterie dzieli się luźno na dwa typy: Gram-dodatnie i Gram-ujemne.

  • Bakterie Gram-dodatnie mają grubą warstwę zbudowaną z polimerów cząsteczek białkowo-cukrowych zwanych peptydoglikanami. Barwienie metodą Grama warstwy peptydoglikanu (czyli ściany komórkowej) substancją chemiczną zwaną fioletem krystalicznym powoduje fioletowe zabarwienie bakterii Gram-dodatnich. Dodatek acetonu lub alkoholu powoduje odwodnienie bakterii, powodując zachowanie fioletowego koloru.
  • Bakterie Gram-ujemne mają dodatkową błonę zewnętrzną, której właściwości są odporne na odwodnienie acetonem/alkoholem i powodują utratę fioletu krystalicznego. Barwnik kontrastowy składający się z fuksyny barwi te bakterie na czerwono lub różowo.

Badanie polega na obejrzeniu bakterii na szkiełku pod mikroskopem. W przypadku zabarwienia bakterie można zobaczyć pod mikroskopem. Bakterie te można zbierać w próbkach takich jak mocz, plwocina i krew. Próbki te służą do określenia, czy bakterie znajdują się w określonej części ciała. Zakażenia są często zlokalizowane w jednej części ciała, takiej jak pęcherz, płuca, a nawet kości, pęcherzyk żółciowy lub skóra. Niektóre infekcje są bardziej uogólnione i rozprzestrzeniają się po całej krwi.

Bakterie barwiące na fioletowo są Gram-dodatnie; te, które zabarwiają się na różowo, są Gram-ujemne. To prosty sposób na poznanie ważnych informacji. Mówi nam, jaki rodzaj zewnętrznej warstwy ochronnej posiada bakteria. Pomaga to lekarzom w podjęciu decyzji, jakie antybiotyki zastosować i które bakterie są odpowiedzialne za infekcję, ponieważ oczekuje się, że niektóre bakterie zachowują się inaczej niż inne.

Niektóre bakterie są Gram-dodatnie, jak Staph Aureus (w tym MRSA ) i bakterie Strep. Inne bakterie są Gram-ujemne, takie jak Salmonella , Shigella i wiele innych bakterii. Bakteria (rodzaj) wywołująca rzeżączkę  i straszliwą postać bakteryjnego zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych, Meninogococcus, jest Gram-ujemna. Niektóre bakterie nie charakteryzują się tak dobrze statusem gramatycznym, ale jest to przydatne w przypadku wielu rodzajów bakterii.

Rodzaje infekcji często mogą być spowodowane przez infekcje Gram-ujemne lub Gram-dodatnie, ale częściej mogą być spowodowane przez jeden lub drugi typ. Zapalenie płuc może być spowodowane jednym i drugim, ale wiele osób cierpi na infekcje Gram-dodatnie wywołane przez bakterie Strep. Zakażenia dróg moczowych  są często spowodowane infekcjami Gram-ujemnymi. Istnieje wiele innych rodzajów infekcji, które mogą być głównie Gram-dodatnie lub Gram-ujemne.

 

Dlaczego jest to ważne

Wiedza o tym, czy nieznany typ bakterii jest gram-ujemny, czy dodatni, może pomóc w identyfikacji bakterii. Lekarze często muszą zgadywać, jakie infekcje ma pacjent. Często, jak to się mówi, muszą leczyć empirycznie, nie wiedząc dokładnie, co jest przyczyną infekcji i jaki antybiotyk jest najlepszy. Znajomość statusu plam Grama pomaga.

Różne bakterie reagują na różne antybiotyki. Zwłaszcza bakterie Gram-dodatnie i Gram-ujemne reagują odmiennie na różne antybiotyki. Wiedza o tym, czy bakterie są Gram-ujemne, czy Pos, może pomóc w podjęciu decyzji, które antybiotyki będą najprawdopodobniej skuteczne.

Barwienie metodą Grama można przeprowadzić w laboratoriach bez dużych zasobów. Wymaga to po prostu mikroskopu, szkiełek, plam i kogoś, kto wie, jak wykonać plamę metodą Grama.

1 Źródło
  1. Boyanova L. Bezpośrednie barwienie metodą Grama i jego różne korzyści w diagnostyce infekcji bakteryjnych . Podyplomowe Med . 2018;130(1):105–110. doi:10.1080/00325481.2018.1398049

Related Posts

Leave a Reply

Your email address will not be published. Required fields are marked *